原代细胞培养过程是怎么样的

　　原代细胞是指从机体取出后立即培养的细胞。一般情况下，常把培养的第1代细胞与传10代以内的细胞统称为原代细胞培养。原代细胞培养需经过准备、处理、剪切、消化分离、计数、培养这几个阶段。具体说明如下：

　　1、准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，进行操作前的洗手、消毒。

　　2、处理：点燃酒精灯，把组织块置于烧杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污。

　　3、剪切：用手术刀将组织切成若干小块，加入比组织块总量多30-50倍的胰蛋白酶液，然后一并倒入三角烧瓶中，结扎瓶口或塞以胶塞。

　　4、消化分离：将三角烧瓶置于用恒温水浴，每隔20分钟摇动一次，在消化过程中发现消化液混浊时，可在镜下观察，如果组织已分散成细胞团或单个细胞，立即终止消化，进行低速分离后加入适量含有血清的培养液。

　　5、计数：用计数板计数，对大多数细胞来说，pH需要控制在7.2-7.4范围内。

　　6、培养：置于37℃的CO2温箱培养，瓶口需用纱布棉塞或螺旋帽堵塞，纱布棉塞易生霉菌，每次换液时需要换新塞。

　　注意，原代细胞的培养得保证无菌环境，并且细胞生长所需要的营养成分得充足。